1、準(zhǔn)備總氮試劑

堿性過(guò)硫酸鉀的制備過(guò)程非常重要。如果掌握不好，會(huì)影響消化效果和測(cè)定結(jié)果。關(guān)于堿性過(guò)硫酸鉀的制備，簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)就是將過(guò)硫酸鉀和氫氧化鈉溶于水，不做其他要求。其實(shí)過(guò)硫酸鉀的溶解速度很慢。要想加快溶解速度，絕對(duì)不能盲目加熱。即使加熱，最好使用水浴加熱法，水浴溫度必須低于60℃，否則過(guò)硫酸鉀會(huì)分解失效。配制此溶液時(shí)，可分別稱(chēng)取過(guò)硫酸鉀和氫氧化鈉，分別配制，然后混合定容，或先配制氫氧化鈉溶液，待其溫度降至室溫后，再加入過(guò)硫酸鉀溶解。如果兩者都溶于燒杯中的水中，應(yīng)緩慢加水，同時(shí)攪拌，以防止氫氧化鈉放熱引起的溶液溫度過(guò)高而造成局部過(guò)硫酸鉀失效。

2、玻璃器皿的清洗

所用的玻璃器皿在使用前要用（1+9）鹽酸浸泡，然后用氨水洗幾次。否則，空白值會(huì)很高或平行度會(huì)很差。

3、消化溫度和壓力的控制

在使用醫(yī)用手持蒸汽滅菌器的實(shí)驗(yàn)室，測(cè)得的壓力為1.1~1.4kg/cm2，溫度為120℃~124℃。在消化過(guò)程中，當(dāng)達(dá)到規(guī)定的溫度和壓力時(shí)，需要開(kāi)始計(jì)時(shí)。我一般的經(jīng)驗(yàn)是直接打開(kāi)氣閥，加熱一段時(shí)間。待蒸汽滅菌器內(nèi)的冷空氣排盡，熱蒸汽放出后，關(guān)閉消解用放氣閥，控制消解溫度在123℃。

4、比色注意事項(xiàng)

本項(xiàng)目的測(cè)量涉及兩個(gè)波長(zhǎng)（220nm和275nm）。建議測(cè)量一組樣品的同一波長(zhǎng)后，調(diào)整到另一個(gè)波長(zhǎng)，進(jìn)行統(tǒng)一測(cè)量。沒(méi)有必要在更換另一個(gè)樣品之前測(cè)量一個(gè)樣品的兩個(gè)吸光度，這樣反復(fù)的波長(zhǎng)調(diào)整會(huì)造成一定的測(cè)量誤差。

5、選擇總氮試劑

過(guò)硫酸鉀是堿性過(guò)硫酸鉀消解紫外分光光度法測(cè)定總氮的重要試劑。

首先，試劑的純度關(guān)系到空白值和測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

一般普通分析純過(guò)硫酸鉀的總氮含量不超過(guò)0.005％。但由于試劑質(zhì)量的差異，一些廠家和批次的試劑氮含量往往達(dá)不到這一要求，導(dǎo)致空白值偏高。

因此，如果條件允許，建議使用優(yōu)級(jí)純?cè)噭?，并盡量降低試劑中的氮含量，從而降低實(shí)驗(yàn)的空白值。